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Polysciences全國代理-上海鼎桑

Polysciences全國代理-上海鼎桑

更新時(shí)間:2024-08-14

產(chǎn)品特點(diǎn):
Polysciences全國代理-上海鼎桑 美國POLYSCIENCES公司成立于1961年,主要生產(chǎn)和經(jīng)營LIFE SCIENCES生命科學(xué)(膠體金,不含甲醛的甲醇等),病理學(xué)和顯鏡學(xué) 微球和粒子和磁珠各種單體和聚體等產(chǎn)品。polysciences公司是世界上zui大zui全的多聚化合物供應(yīng)商,同時(shí)是世界*的免疫學(xué),組織化學(xué)試劑耗材供應(yīng)商.
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)地進(jìn)口加工定制

我們公司zui大優(yōu)勢(shì)是強(qiáng)大的采購

  上海鼎桑生物科技有限公司一家專注于生命科學(xué)的科技企業(yè),由在國內(nèi)科研試劑領(lǐng)域有著豐富從業(yè)經(jīng)驗(yàn)的技術(shù)團(tuán)隊(duì)和管理團(tuán)隊(duì)組建而成,專營進(jìn)口生物試劑,科學(xué)儀器,實(shí)驗(yàn)消耗品等。
       公司將不斷把上優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品引入國內(nèi)市場,滿足客戶的需求,公司也將緊跟生命科學(xué)的發(fā)展,為廣大科研工作者探索生命科學(xué)的奧秘奉獻(xiàn)綿薄之力.

Polysciences全國代理-上海鼎桑

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PEI轉(zhuǎn)染手冊(cè)

轉(zhuǎn)染操作流程:
 
  1、細(xì)胞傳代:

轉(zhuǎn)染前24h內(nèi)分離293T細(xì)胞至含10%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基 中進(jìn)行傳代培養(yǎng),接種密度如下:
         6孔板:0.5x106細(xì)胞
         10cm培養(yǎng)皿:4.0x106細(xì)胞
         15cm培養(yǎng)皿:9.0x106細(xì)胞

2、轉(zhuǎn)染

轉(zhuǎn)染前將所有試劑置于室溫。

2.1質(zhì)粒DNA的稀釋

在無菌試管中,用無血清的DMEM W / O酚紅培養(yǎng)基(濃度為10%)稀釋質(zhì)粒DNA(ug)。病毒包裝體(psPAX2):病毒包膜(pMD2G)和重組質(zhì)粒DNA的稀釋比例分別為4:2:1。
       

6孔板:200ul+3ug的DNA
        10cm培養(yǎng)皿:1ml+7-8ug的DNA
        15cm培養(yǎng)皿:2ml+11-12ug的DNA

   2.2 轉(zhuǎn)染復(fù)合體形成

將PEI(1ug/uL)加入已稀釋的總DNA中,PEI與DNA(ug)的混合比率為3:1。加入后立即渦旋混合。
      

 6孔板:9ul PEI復(fù)合體(1ug/ul)=9ug
        10cm培養(yǎng)皿:21ul PEI復(fù)合體(1ug/ul)=21ug
        15cm培養(yǎng)皿:33ul PEI復(fù)合體(1ug/ul)=33ug
將添加到細(xì)胞的DNA/ PEI的混合物在室溫下孵育15分鐘。


4、收獲轉(zhuǎn)染細(xì)胞

轉(zhuǎn)染后48小時(shí)內(nèi)收獲轉(zhuǎn)染細(xì)胞/或病毒上清。
 
試劑的配制:
PEI(1ug/ul) Polysciences(CAT#23966-2配制成儲(chǔ)液:)
1、將無內(nèi)毒素的無菌水加熱至80℃左右溶解PEI,冷卻到室溫。
2、調(diào)整pH值至7.0,用0.22um的濾器過濾消毒,分裝后儲(chǔ)存在-20℃。工作液可保持在4℃

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